公交車淩晨2點到5點必須在高速公路上休息。根據《道路客運企業安全管理標準》，長途客運車輛在淩晨2時至5時停止運行或進行接運，淩晨2時後禁止長途客車通過收費站。這個時間段正在高速公路上行駛的長途客車，被引導到服務區或客運站附近停車休息。從事固定線路、高鐵快線和短途班車業務、單程運營裏程小於100公裏的客運車輛的機場，在確保安全的前提下，淩晨2時至5時不受限制。
法律依據
《道路旅客運輸企業安全管理規範》長途客運車輛淩晨2時至5時停止運行或進行接運。淩晨2點以後，收費站禁止長途客車通行。該時間段行駛在高速公路上的長途客車被引導至服務區或客運站停車休息。從事固定線路、高鐵快線和短途班車業務、單程運營裏程小於100公裏的客運車輛的機場，在確保安全的前提下，淩晨2時至5時不受限制。