1，辱國。
2.激發了日本人民對中國的愛國鬥爭。
各大城市的愛國組織紛紛喊話，舉行集會遊行，誓不承認叛國罪“二十壹條”，要求懲處漢奸陸征祥、曹儒林。上海各界人士舉行了壹萬多人參加的國民大會，表示對日本的拒絕到底。
上海等地工人罷工，各地青年學生組織團體號召抗日救國，掀起聲勢浩大的抵制日貨運動。中華全國教育聯合會決定將日本接受最後通牒的日子5月9日定為“國恥紀念日”。
3.加速了袁世凱政府的垮臺和孫中山的上臺。
4.改變了中國與列強的矛盾立場:中國與帝國主義的主要矛盾從英美轉移到日本。
5.助長了日本軍國主義的氣焰。
法律依據:《中華人民共和國民法典》
第壹百四十四條無民事行為能力人實施的民事法律行為無效。
第壹百四十六條行為人和相對人出於虛假意思的民事法律行為無效。以虛假意思表示隱匿的民事法律行為的效力，依照有關法律規定處理。
第壹百五十三條違反法律、行政法規強制性規定的民事法律行為無效。但是，強制性規定不使民事法律行為無效的除外。違反公序良俗的民事法律行為無效。
第壹百五十四條行為人與相對人惡意串通，損害他人合法權益的民事法律行為無效。